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技術(shù)文章

ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)要設(shè)置復(fù)孔的原因分析

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  ELISA試劑盒是指食品中的激素、藥物、霉菌毒素、過(guò)敏原殘留、轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的檢測(cè)試劑盒,以及微生物、維生素等的檢測(cè)產(chǎn)品。包括植物病毒、細(xì)菌、真菌、植物激素和轉(zhuǎn)基因作物的農(nóng)業(yè)診斷試劑盒,以及動(dòng)植物疾病診斷類如豬、牛、羊、馬等家畜和禽類以及寵物類檢測(cè)試劑盒。
 
  ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)要設(shè)置復(fù)孔的原因:
 
  一、計(jì)算平均值,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果更準(zhǔn)確;
 
  二、解決實(shí)驗(yàn)中誤操作造成的跳孔現(xiàn)象;
 
  三、計(jì)算CV值,對(duì)實(shí)驗(yàn)的操作和試劑盒的精密度進(jìn)行評(píng)估。
 
  ELISA試劑盒的標(biāo)本要求:
 
  1. 血清:溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
 
  2. 血漿:根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或其他作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
 
  3. 尿液:無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
 
  4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
 
  5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑,用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
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